Определение группы крови цоликлонами

Определение группы крови цоликлонами – это прямое исследование её эритроцитов на наличие групповых антигенов (агглютиногенов) с помощью солевого раствора моноклональных антител. Анализ определяет соответствие группы крови по системе AB0 – группа 0 (отсутствие агглютиногенов A и B), группа A (наличие A, отсутствие B), группа B (наличие B, отсутствие A), группа AB (наличие и A и B). В основе метода – агглютинация, реакция взаимодействия с соответствующими антителами, выражающаяся в склеивании эритроцитов.

Цоликлоны представляют собой реагенты, содержащие антитела анти-A и анти-B, способные вызывать агглютинацию при взаимодействии с одноимёнными антигенами. Это способствует косвенному определению наличия или отсутствия агглютиногенов в исследуемом образце крови. Высокая специфичность искусственно произведённых моноклональных антител позволяет добиться более точных результатов, чем традиционное исследование с использованием стандартных сывороток.

Когда и кем проводится анализ

Процедура определения основной группы крови прямым методом выполняется первично, при поступлении больного в стационар. Прямое исследование может осуществляться лечащим врачом, имеющим дополнительную профессиональную подготовку в области иммуногематологии или врачом-трансфузиологом. Во всех остальных случаях (перед хирургической операцией, переливанием крови, во время беременности) выполняется перекрёстное исследование, проверка (и перепроверка) производится врачом или биологом клинико-лабораторной диагностики.

Как определяют основные группы AB0 цоликлонами

Перед исследованием визуально оценивают пригодность цоликлонов к работе: не допускается использование мутных, с осадком или другими загрязнениями реактивов. Ранее вскрытый раствор должен быть надёжно закрыт во избежание испарения жидкости. Анализ проводится в температурном диапазоне 15-25C на планшете со смачиваемой поверхностью.

Алгоритм определения основных групп крови AB0 цоликлонами:

• Планшет подписывают – указывают фамилию, имя и отчество пациента, маркируют зоны нанесения соответствующих цоликлонов (порядок нанесения слева направо: анти-A, анти-B, анти-AB).
• Цоликлоны наносят по большой капле (100 мкл) в подписанные лунки.
• Эритроциты осторожно забирают пипеткой из пробирки с образцом крови пациента и располагают маленькую каплю (10-30 мкл) вблизи с цоликлонами.
• Капли образца и реагента тщательно перемешивают стеклянной лопаткой.
• Планшет осторожно покачивают в течение трёх минут. Агглютинация обычно происходит спустя 3-6 секунд, однако при наличии слабых видов антигенов в крови пациента реакция начинается позднее.

Результаты взаимодействия исследуемой крови с реактивом видны невооружённым глазом. Под положительным (+) результатом подразумевают агглютинацию – в этом случае в субстрате образуются красные «зёрна», сливающиеся затем в крупные хлопья. Об отрицательном (-) результате свидетельствует равномерно окрашенная в красный цвет проба.

Трактовка результатов исследования:

• Группа крови 0 – все три пробы имеют отрицательный результат.
• Группа крови A – отрицательный результат с цоликлоном анти-B, положительный – с анти-A и анти-AB.
• Группа крови B – отрицательный результат с цоликлоном анти-A, положительный – с анти-B и анти-AB.
• Установление группы AB требует дополнительной проверки. Ситуацию, когда все три пробы имеют положительный результат можно интерпретировать двояко: наличие неспецифической агглютинации исследуемых эритроцитов или соответствие крови группе AB. Для исключения неспецифической реакции проводят контрольную пробу с раствором натрия хлорида (0,9%) по аналогичному алгоритму. Кровь соответствует группе AB, если результат контрольной пробы отрицательный.

По аналогичной схеме выполняется определение резус-фактора крови (по реакции прямой агглютинации с цоликлонами анти-D). Прямое исследование группы крови AB0 цоликлонами нуждается в обязательной проверке перекрёстным методом с использованием стандартных эритроцитов (для этого производится анализ сыворотки крови на наличие агглютининов). В отдельных случаях, при сомнительных результатах анализа (например, при беременности, у больных с рядом тяжёлых патологий – сепсисом, злокачественной опухолью, обширным ожогом) образец крови направляется в специальную лабораторию службы крови для детального изучения.

31.08.2020, Медицина | Нет комментариев